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1.環(huán)境因素的影響

對同一水樣在自然環(huán)境下與無菌室中分別進行總大腸菌群和大腸埃希氏菌檢測， 培養(yǎng)時間為 24 h，培養(yǎng)溫度為( 36 ± 1) ℃ ，水樣在自然環(huán)境下與無菌室內(nèi)總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測值相對偏差在 10% 以內(nèi)，樣品T檢驗分析p＞0．05，監(jiān)測值差異不顯著，表明此方法對實驗環(huán)境是否無菌沒有嚴(yán)格的要求。

2.培養(yǎng)溫度

總大腸菌群和大腸埃希氏菌的檢測培養(yǎng)溫度需嚴(yán)格控制在35～37℃，培養(yǎng)溫度過高或過低均使檢測結(jié)果不準(zhǔn)。   

3.培養(yǎng)時間

總大腸菌群培養(yǎng)16～20 h 的檢測結(jié)果與24 h相比均有顯著性差異( p＜0.05)，培養(yǎng)22、28 與 24 h 結(jié)果差異不顯著( p＞0.05)；而大腸埃希氏菌培養(yǎng) 16 ～22 h 的檢測結(jié)果與 24 h 相比均有顯著性差異( p＜0.05)，培養(yǎng)28 h與24 h結(jié)果無顯著性差異( p＞0.05)。此方法對總大腸菌群的檢測培養(yǎng)時間在 22～28h之間可以得到精確的結(jié)果，而大腸埃希氏菌的檢測則需24～28h；無論振蕩培養(yǎng)或者靜置培養(yǎng)對培養(yǎng)結(jié)果基本沒有影響。

4.培養(yǎng)方式

處理完的水樣倒入51孔板中，在盡量去除氣泡的情況下，將兩平行板分別在靜置和振蕩兩種條件下培養(yǎng)24 h，配對樣品T檢驗分析兩種方式下檢測結(jié)果無顯著性差異( p＞0.05) ，說明振蕩或靜置的培養(yǎng)方式對檢測結(jié)果影響不大。