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酶底物法程控定量封口機檢測大腸桿菌方法

來源:西安海研生物科技公司         發(fā)布時間:2019-04-18

采用酶底物法對地表水水樣進行不同倍數(shù)的稀釋后進行培養(yǎng)檢測,觀察地表水結果變化。結果表明:地表水水樣稀釋倍數(shù)越小,結果越精確。采用酶底物法測定地表水中的糞大腸菌群具有快速、簡便的特點,精確掌握水樣稀釋倍數(shù)對測定結果就越精確。

程控定量封口機

加入含有總大腸菌群細菌的水樣,放入程控定量封口機中,目標細菌在Minimal

MediumONPG-MUG培養(yǎng)基中36℃培養(yǎng),總大腸菌群細菌產生的特異性生物酶β

一半乳糖苷酶能分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG,使培養(yǎng)呈現(xiàn)黃色;

同時水樣中大腸埃希氏菌產生特異性的β一葡萄糖醛酸酶分解Minimal?Medium?ONPG-MUG

培養(yǎng)基中的熒光底物MUG,產生特征性熒光。同樣原理,耐熱大腸菌群(糞大腸菌群)在44.5

℃培養(yǎng)時會分解MinimalMediumONPG-MUG培養(yǎng)基中的色源底物ONPG

,使培養(yǎng)基呈現(xiàn)黃色。

9900Z?SEALER?PLUS: 智能程控定量封口機配合51孔定量盤或97

孔定量盤提供簡單、快速、精確的定量檢測總

大腸菌群、大腸埃希氏菌、糞(耐熱)大腸菌群、腸球菌和綠膿假單胞菌的實驗方案。51孔定量盤和97孔定量盤是基于傳統(tǒng)方法可能數(shù)(MPN)

統(tǒng)計模型而設計的半自動定量方法。

程控定量封口機自動將樣品/試劑混合液分配到獨立孔中。

培養(yǎng)結束后,陽性孔數(shù)可以轉化為MPN值。

51孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-200MPN值。

97孔定量盤可檢測每100mL水樣中1-2,419MPN值。

整個檢測過程手工操作時間小于1分鐘。

【使用方法】

定性測試:

第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解,36℃培養(yǎng)24h;

第二步、結果判讀

無色=陰性

黃色=總大腸菌群陽性

黃色+熒光=大腸埃希氏菌群陽性

注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色為陽性

定量檢測

第一步、在100ml水樣中加入試劑,溶解;

第二步、倒入51孔定量檢測盤(定量孔板)或97孔定量檢測盤(定量孔板)中;

第三步、用程控定量封口機對定量檢測盤(定量孔板)進行封裝,36℃培養(yǎng)24h;

第四步、51孔定量檢測盤(定量孔板)結果判讀:

無色=陰性

黃色格子=總大腸菌群陽性

黃色+熒光格子=大腸埃希氏菌群陽性

查對照MPN表計數(shù)

注:耐熱大腸群菌(糞大腸菌群)需44.5℃培養(yǎng)24h后,觀察黃色格子為陽性結果,查對照MPN表計數(shù)。

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